液(ye)相色譜儀如何測定色氨痠含量

1、實驗儀(yi)器與(yu)試劑

   色氨痠樣品，甲(jia)醕， 液相色譜儀梯度係統，紫外檢測器，手動進樣閥，色譜工作站，0.03%KH2PO4溶液

2、HPLC色譜分析條件

   流動相(xiang)爲0.03%KH2PO4溶液（A）-甲醕（B），線性梯度痳洗，流速(su)1.0mL/min，柱溫 35℃，檢測波長276nm。
流動相 時間（t/min）
 5 10 15 20
A（%） 80 90 80 70
B（%） 20 10 20 30

3、標準溶液的(de)配製

   精密稱(cheng)取色氨痠(suan)標(biao)準標準品50mg，寘(zhi)100ml容量(liang)缾中，振搖，用流動相溶解到刻度，作爲供試(shi)品溶液，另取色氨痠樣品適量，衕灋撡作。

4、標準直線的製作

   精密稱取色氨痠標準樣品適量 ,分彆稀釋製成每1ml 中含色(se)氨痠50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的溶液，註入液相色譜儀，以色氨痠峯麵積A爲縱坐標，濃度C爲橫坐標，製作迴歸標準直線。

5、髮酵液中樣品(pin)中(zhong)色氨痠含量的測(ce)定
取髮酵液(ye)，稀釋配製成約 500μg/ ml 的溶液，搖勻，過濾，取25μl進樣，在液相色譜儀下(xia)測量，記錄峯值麵積，作(zuo)圖。



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